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藥物的生物學特性范文1

【關鍵詞】 藥劑特性；伴生物質；三七總皂苷

DOI：10.14163/ki.11-5547/r.2015.25.205

目前， 對心血管系統、中樞神經系統等疾病的治療中， 三七總皂苷被廣泛應用。三七皂苷R1、人參皂苷Rg1以及人森皂苷Rb1等是三七總皂苷的主要成分。以提取、分離技術為基礎， 從三七中將三七總皂苷提取出來。但在實際臨床應用過程中， 三七總皂苷口服效果不佳， 這是由于其腸道黏膜透過性較差所致。對三七總皂苷生物藥劑特性產生影響的重要因素在于不同伴生物質， 為了解三七總皂苷受不同伴生物質影響的效果不同， 作者測定和分析了不同伴生物三七總皂苷電導率以及粘度系數物理特性。現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 材料儀器 電子天平、粘度計、電導率儀、雙蒸水、濃度水溶解性固體溶液、三七藥材。

1. 2 方法

1. 2. 1 制取不同伴生物三七總皂苷 先將三七藥材選取出來， 對其進行回流提取3次， 提取所使用的乙醇量為6倍量， 1 h的間隔時間。之后合并所提取出的溶液， 同時減壓回收乙醇， 再經過濃縮后將其過濾。為獲得4種由不同伴生物所構成的三七總皂苷， 應使用正向剔除分離法制備經過過濾的溶液， 于是得到甲、乙、丙、丁4種三七總皂苷。

1. 2. 2 測定電導率

1. 2. 2. 1 制備試品溶液在容量瓶中放入稱取好的水溶解性固體溶液， 定容采用蒸餾水， 之后將儲備溶液配制出。并在容量瓶中將分別取出的儲備液放入， 定容使用蒸餾水， 使用溶液便配制出來。

1. 2. 2. 2 測定不同伴生物三七總皂苷電導率將甲、乙、丙、丁4種不同伴生物三七總皂苷用電子天平適量稱取。濃度為試品的溶液可用蒸餾水進行配制， 每一份試品需進行3次測試。

1. 2. 3 測定粘性系數

1. 2. 3. 1 制備供試試驗品溶液不同伴生物的三七總皂苷量可用電子天平準確稱取， 將去離子水超聲攪拌溶解加入三七總皂苷， 分別配制成試品溶液。

1. 2. 3. 2 測定粘度系數測定三七總皂苷粘度會受到轉子型號、剪切速率以及溫度等的影響， 因此必須進行設定， 包括穩定的粘度數據， 轉子型號扭矩值， 剪切速率， 同一溫度等， 與測定要求相符。按照重量比例用蒸餾水配制不同伴生物三七皂苷試驗樣品。

2 結果

測定甲、乙、丙、丁4種伴生物三七總皂苷導電率、粘度系數。見表1， 表2。

3 討論

在抗血栓、擴張腦血管、對血小板聚集形成一致、控制并降低機體耗氧量等方面， 三七總皂苷發揮著十分重要的作用。現今， 臨床治療中越來越廣泛地使用三七總皂苷藥物。為深刻認識到三七總皂苷受不同伴生物質影響的不同效果， 本文對不同伴生物三七總皂苷的電導率及粘度系數進行了測定。在容量瓶中放入稱取好的水溶解性固體溶液， 定容采用蒸餾水， 之后將儲備溶液配制出。并在容量瓶中將分別取出的儲備液放入， 定容使用蒸餾水， 這樣， 使用溶液便配制出來。將甲、乙、丙、丁4種不同伴生物三七總皂苷用電子天平適量稱取。濃度為試品的溶液可用蒸餾水進行配制， 每一份試品需進行3次測試。在藥物溶液中， 通過靜電， 離子的作用會抵消中性物質電荷， 從而改變藥物物理性質， 這樣的結果就是更加容易使藥物透過生物膜， 換言之， 在藥物溶液中， 影響藥物吸收的一個因素就是電導率。

將不同伴生物的三七總皂苷量用電子天平準確稱取， 將去離子水超聲攪拌溶解加入三七總皂苷， 分別配制成試品溶液。測定三七總皂苷粘度會受到轉子型號、剪切速率以及溫度等的影響， 因此必須進行設定， 包括穩定的粘度數據， 轉子型號扭矩值， 剪切速率， 同一溫度等， 與測定要求相符。按照重量比例用蒸餾水配制不同伴生物三七皂苷試驗樣品。藥物體系所具有的粘度與其吸收具有一定的聯系， 作者在測定了不同伴生物三七總皂苷粘度后， 三七總皂苷生物藥劑的特性受伴生物質的影響程度可通過結果表格看出， 其粘度關系為甲乙丙丁， 同時， 甲與乙的粘度較為接近、丙與丁的粘度較為接近， 由此得出， 對于三七總皂苷粘度而言， 多糖單、氨基酸等水溶性伴生物質的影響很大。

綜上所述， 由于三七總皂苷在抗血栓、擴張腦血管、降低血小板、抑制機體耗氧量等方面作用顯著， 因此研究、分析三七總皂苷伴生物質電導率和粘度具有重要意義。通過調節三七總皂苷伴生物電導率及粘度， 讓三七總皂苷的吸收得意合理改善， 可促進其在疾病治療中的藥效。

參考文獻

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藥物的生物學特性范文2

目的：研究益腎中藥復方對抗措施對尾部懸吊大鼠承重骨的影響. 方法：SD雄性大鼠18只，按體質量配對后隨機分為對照組(6只)、懸吊組(6只)和中藥處理組(6只). 在尾部懸吊大鼠模型模擬失重的基礎上，中藥處理組大鼠每日給予中藥復方灌胃. 利用物理測量和三點彎曲等實驗，觀察4 wk中益腎中藥復方灌胃對尾部懸吊大鼠股骨生長、生物力學特性的影響. 結果：懸吊組和中藥處理組大鼠股骨質量、灰分、直徑和密度均較對照組大鼠下降(P

【關鍵詞】 模擬失重 中藥復方 骨 生物力學

0引言

航天員在失重環境下，生理系統會出現一些變化：心血管系統失調、航天貧血癥、肌肉萎縮、骨質脫鈣等. 而失重引起骨骼系統的變化是航天醫學工作者關注的問題之一. 航天實踐表明，失重條件下骨形成減弱，骨吸收相對增強，失重性骨量減少和鈣代謝紊亂呈進行性過程，航天員在飛行過程中平均每月喪失1%～2%的鈣 ［1］. 為防止長期太空飛行中可能出現的骨質疏松、骨折等嚴重后果，人們設計和采用了多種對抗失重的方法，如體育鍛煉、藥物、添加營養物質等［ 2 ］. 雖然這些措施減緩了骨量減少的速度，卻不能有效阻止這一現象的發生.

傳統中藥毒副作用小、藥效溫和，近年在航天醫學領域的應用逐漸受到國內外重視. 中醫學理論的精華在于“整體觀念”和“辨證施治”. 在航天微重力、輻射、狹小隔離環境等綜合因素作用下，人體神經內分泌免疫系統將會發生一系列生理功能變化. 有研究者認為在航天微重力環境較長時間停留及模擬失重狀態均可出現腎虛及血瘀之證［3］. 沈羨云等根據對兔頭低位-20°限制活動模型觀察，提出利用益氣活血等中藥行防護的觀點［4］. 本實驗我們根據中醫“腎主骨”的理論和航天期間的特殊變化，從整體調節入手，在尾部懸吊大鼠模型模擬失重的基礎上，給予益腎強骨中藥，考察了其對尾部懸吊大鼠骨丟失的防治作用，為中藥防護失重性骨丟失提供實驗依據，初步考察此種對抗方法的作用效果及其機制.

1材料和方法

1.1材料SD清潔級大鼠，雄性，18只，由第四軍醫大學實驗動物中心提供，動物合格證號：軍醫動字第C98008. 于動物飼養室內適應1 wk. 實驗開始當日隨機分為對照組（6只）、 懸吊組（6只）和中藥處理組（6只）， 體質量分別為： (200±7) g； （203±7） g；（206±5） g. 4 wk實驗期間，給予充足清潔飲水和攝食，大鼠可自由活動. 室溫保持在（22±2）℃，人工控制室內照明，保持12 h光照（08:00~20:00）和黑暗（20:00~次日8:00），交替循環.

1.2方法懸吊組大鼠采用李勇枝等［5］改進的方法做尾部懸吊，大鼠始終保持30°頭低位及后肢自由懸垂不荷重狀態. 中藥處理組在尾部懸吊處理的基礎上，每天給予益腎中藥復方灌胃. 益腎中藥復方由黃芪、丹參、杞子、山楂等構成，由本醫院制劑室分別煎湯浸膏，制成干粉備用. 用蒸餾水將中藥干粉配制成懸濁液，按照100～110 g/(kg·d)的劑量，每天灌胃1 次. 自實驗期滿開始，依次斷頭處死大鼠，盡快取出其雙側股骨，去除結締組織. 右側股骨測量一般物理指標，包括質量（濕）、長度、直徑、體積、密度、質量（干）和灰分質量，除后兩項外其余均在處死大鼠后立即測量. 質量及灰分采用ACA 2100型電子天平測量（精度為1×10-4 g，Denver Instrument Company，美國）. 測質量（干） 時，標本先在118℃加熱烘烤48 h至質量恒定；然后在灰化爐中800℃，24 h完全灰化測其灰分. 長度和直徑（骨干中點最細處）使用精度為0.02 mm 游標卡尺測量. 用排水法測量體積（精度為1×10-4 cm3）. 濕質量密度為濕質量和體積的比值.

左側股骨即刻密封保存于4℃環境中，并于2 d內進行三點彎曲實驗. 三點彎曲實驗在Instron 1195 (Instron，英國)電子拉伸機上進行. 股骨放置方向及位置保持不變，跨距為16 mm，加載砝碼2 kg，加載速度為0.05 mm/min. 通過所得載荷－應變曲線計算彈性載荷、最大載荷、破壞載荷、極限撓度、破壞撓度、剛性系數和韌性系數等力學指標.

統計學處理：所得數據均以x±s表示，采用SPSS 10.0統計軟件進行統計分析，組間比較利用方差分析和LSDt檢驗，P

2結果

2.1一般情況對照組大鼠在實驗期間體質量持續增加，而懸吊組和中藥處理組大鼠體質量在實驗期間的前4 d，均呈下降趨勢，從第5日開始逐漸增加. 實驗結束時，3組大鼠的體質量分別為：對照組（292±11） g；懸吊組（255±8） g；中藥處理組（263±7） g. 懸吊組和中藥處理組大鼠平均體質量低于對照組大鼠，而懸吊組和中藥處理組之間大鼠平均體質量無統計學差異.

2.2大鼠股骨理化指標的變化3組大鼠在股骨長度方面未見明顯差異. 懸吊組和中藥處理組大鼠在股骨質量(濕、干)、灰分、直徑和密度等方面均較對照組大鼠下降(P

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2.3大鼠股骨力學特性的變化懸吊組大鼠在股骨彈性載荷、最大載荷和剛性系數等方面均較對照組下降（P

3討論

力學特性是反映骨的生長代謝情況的一個重要指標.航天失重和模擬失重均可引起骨力學特性的顯表2各組大鼠股骨（左）力學指標著降低，Cosmos飛行發現大鼠股骨和脊柱的力學性能下降［2］. Skylab23飛行大鼠骨的強度和硬度均較對照下降. MoreyHolton等［6］利用后肢懸吊大鼠模型發現股骨的所有彎曲參數(硬度、負荷、能量) 較對照顯著降低. 前人的實驗結果提示失重引起骨力學性能降低，且主要發生在承重骨. 本次實驗也得到類似結果，懸吊組大鼠股骨的股骨質量(濕、干)、灰分、直徑和密度、股骨彈性載荷、最大載荷和剛性系數等方面均較對照組顯著下降，韌性系數和彈性范圍內的撓度載荷比值較對照組顯著上升，表明尾部懸吊使大鼠股骨骨鈣丟失，力學性能降低.

國內外在進行失重藥物防護措施的研究時，一般是從各自的專業領域出發，針對失重對不同生理系統的影響，采用不同的藥物. 我們認為航天中雖然各生理系統的反應不一，表現不同，但它們的起因是一致的，都是由于失重引起的體液頭向分布和運動減退所產生的一種適應失重環境的征候群(航天適應性綜合征)［7］ . 在這個征候群中，各個生理系統有其各自的表證和特點，但其內在的機制卻互相聯系、互相制約. 所以在進行本課題研究時，我們從中醫“審證求因”“辯證論治”的理論出發，分析失重引起生理變化的特點，確定以補腎、益氣活血中藥為主來選擇中藥，最后選定了黃芪、丹參、杞子、山楂等進行實驗.

骨礦鹽含量反映骨中無機質含量. 而且由于單純骨礦鹽含量測定不能表現骨結構和材料特征的變化，因此結合骨力學指標測定可以更全面評價骨質量，反映骨骼抗骨折能力. 最大載荷和彈性載荷反映骨結構力學特性，它們的變化反映骨小梁質量、結構連續性和皮質厚度的改變［ 8］. 與懸吊組大鼠相比，中藥處理組大鼠的股骨直徑和密度有顯著改善，彈性載荷顯著提高，在質量、灰分、最大載荷、剛性系數和撓度載荷比值等方面有提高的趨勢；表明采用補腎、益氣活血中藥對抗措施后，模擬失重大鼠股骨的生長和力學性能有一定恢復.

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藥物的生物學特性范文3

“生物信息學”是英文單詞“bioinformatics”的中文譯名，其概念是1956年在美國田納西州gatlinburg召開的“生物學中的信息理論”討論會上首次被提出的［1］，由美國學者lim在1991年發表的文章中首次使用。生物信息學自產生以來，大致經歷了前基因組時代、基因組時代和后基因組時代三個發展階段［2］。2003年4月14日，美國人類基因組研究項目首席科學家collins f博士在華盛頓隆重宣布人類基因組計劃（human genome project，hgp）的所有目標全部實現［3］。這標志著后基因組時代（post genome era，pge）的來臨，是生命科學史中又一個里程碑。生物信息學作為21世紀生物技術的核心，已經成為現代生命科學研究中重要的組成部分。研究基因、蛋白質和生命，其研究成果必將深刻地影響農業。本文重點闡述生物信息學在農業模式植物、種質資源優化、農藥的設計開發、作物遺傳育種、生態環境改善等方面的最新研究進展。

1.生物信息學在農業模式植物研究領域中的應用

1997年5月美國啟動國家植物基因組計劃（npgi），旨在繪出包括玉米、大豆、小麥、大麥、高粱、水稻、棉花、西紅柿和松樹等十多種具有經濟價值的關鍵植物的基因圖譜。國家植物基因組計劃是與人類基因組工程（hgp）并行的龐大工程［4］。近年來，通過各國科學家的通力合作，植物基因組研究取得了重大進展，擬南芥、水稻等模式植物已完成了全基因組測序。人們可以使用生物信息學的方法系統地研究這些重要農作物的基因表達、蛋白質互作、蛋白質和核酸的定位、代謝物及其調節網絡等，從而從分子水平上了解細胞的結構和功能［5］。目前已經建立的農作物生物信息學數據庫研究平臺有植物轉錄本（ta）集合數據庫tigr、植物核酸序列數據庫plantgdb、研究玉米遺傳學和基因組學的mazegdb數據庫、研究草類和水稻的gramene數據庫、研究馬鈴薯的pomamo數據庫，等等。

2.生物信息學在種質資源保存研究領域中的應用

種質資源是農業生產的重要資源，它包括許多農藝性狀（如抗病、產量、品質、環境適應性基因等）的等位基因。植物種質資源庫是指以植物種質資源為保護對象的保存設施。至1996年，全世界已建成了1300余座植物種質資源庫，在我國也已建成30多座作物種質資源庫。種質入庫保存類型也從單一的種子形式，發展到營養器官、細胞和組織，甚至dna片段等多種形式。保護的物種也從有性繁殖植物擴展到無性繁殖植物及頑拗型種子植物等［6］。近年來，人們越來越多地應用各種分子標記來鑒定種質資源。例如微衛星、aflp、ssap、rbip和snp等。由于對種質資源進行分子標記產生了大量的數據，因此需要建立生物信息學數據庫和采用分析工具來實現對這些數據的查詢、統計和計算機分析等［7］。

3.生物信息學在農藥設計開發研究領域中的應用

傳統的藥物研制主要是從大量的天然產物、合成化合物，以及礦物中進行篩選，得到一個可供臨床使用的藥物要耗費大量的時間與金錢。生物信息學在藥物研發中的意義在于找到病理過程中關鍵性的分子靶標、闡明其結構和功能關系，從而指導設計能激活或阻斷生物大分子發揮其生物功能的治療性藥物，使藥物研發之路從過去的偶然和盲目中找到正確的研發方向。生物信息學為藥物研發提供了新的手段［8，9］，導致了藥物研發模式的改變［10］。目前，生物信息學促進農藥研制已有許多成功的例子。itzstein等設計出兩種具有與唾液酸酶結合化合物：4-氨基-neu5ac2en和4-胍基-neu5ac2en。其中，后者是前者與唾液酸酶的結合活性的250倍［11］。目前，這兩種新藥已經進入臨床試驗階段。tang sy等學者研制出新一代抗aids藥物saquinavir［12］。pungpo等已經設計出幾種新型高效的抗hiv-1型藥物［13］。楊華錚等人設計合成了十多類數百個除草化合物，經生物活性測定，部分化合物的活性已超過商品化光合作用抑制劑的水平［14］。

現代農藥的研發已離不開生物信息技術的參與，隨著生物信息學技術的進一步完善和發展，將會大大降低藥物研發的成本，提高研發的質量和效率。

4.生物學信息學在作物遺傳育種研究領域中的應用

隨著主要農作物遺傳圖譜精確度的提高，以及特定性狀相關分子基礎的進一步闡明，人們可以利用生物信息學的方法，先從模式生物中尋找可能的相關基因，然后在作物中找到相應的基因及其位點。農作物的遺

傳學和分子生物學的研究積累了大量的基因序列、分子標記、圖譜和功能方面的數據，可通過建立生物信息學數據庫來整合這些數據，從而比較和分析來自不同基因組的基因序列、功能和遺傳圖譜位置［15］。在此基礎上，育種學家就可以應用計算機模型來提出預測假設，從多種復雜的等位基因組合中建立自己所需要的表型，然后從大量遺傳標記中篩選到理想的組合，從而培育出新的優良農作物品種。

5.生物信息學在生態環境平衡研究領域中的應用

在生態系統中，基因流從根本上影響能量流和物質流的循環和運轉，是生態平衡穩定的根本因素。生物信息學在環境領域主要應用在控制環境污染方面，主要通過數學與計算機的運用構建遺傳工程特效菌株，以降解目標基因及其目標污染物為切入點，通過降解污染物的分子遺傳物質核酸 dna，以及生物大分子蛋白質酶，達到催化目標污染物的降解，從而維護空氣［16］、水源、土地等生態環境的安全。

美國農業研究中心（ars） 的農藥特性信息數據庫（ppd） 提供 334 種正在廣泛使用的殺蟲劑信息，涉及它們在環境中轉運和降解途徑的16種最重要的物化特性。日本豐橋技術大學（toyohashi university of technology） 多環芳烴危險性有機污染物的物化特性、色譜、紫外光譜的譜線圖。美國環保局綜合風險信息系統數據庫（iris） 涉及 600種化學污染物，列出了污染物的毒性與風險評價參數，以及分子遺傳毒性參數［17］。除此之外，生物信息學在生物防治［18］中也起到了重要的作用。網絡的普及，情報、信息等學科的資源共享，勢必會創造出一個環境微生物技術信息的高速發展趨勢。

6.生物信息學在食品安全研究領域中的應用

食品在加工制作和存儲過程中各種細菌數量發生變化，傳統檢測方法是進行生化鑒定，但所需時間較長，不能滿足檢驗檢疫部門的要求，運用生物信息學方法獲得各種致病菌的核酸序列，并對這些序列進行比對，篩選出用于檢測的引物和探針，進而運用pcr法［19］、rt-pcr法、熒光rt-pcr法、多重pcr［20］和多重熒光定量pcr等技術，可快速準確地檢測出細菌及病毒。此外，對電阻抗、放射測量、elisa法、生物傳感器、基因芯片等［21-25］技術也是未來食品病毒檢測的發展方向。

轉基因食品檢測是通過設計特異性的引物對食品樣品的dna提取物進行擴增，從而判斷樣品中是否含有外源性基因片段［26］。通過對轉基因農產品數據庫信息的及時更新，可準確了解各國新出現和新批準的轉基因農產品，便于查找其插入的外源基因片段，以便及時對檢驗方法進行修改。目前由于某些通過食品傳播的病毒具有變異特性，以及檢測方法的不完善等因素影響，生物信息學在食品領域的應用還比較有限，但隨著食品安全檢測數據庫的不斷完善，相信相關的生物信息學技術將在食品領域發揮越來越重要的作用。 　生物信息學廣泛用于農業科學研究的各個領域，但是僅有信息資源是不夠的，選出符合自己需求的生物信息就需要情報部門，以及信息中介服務機構提供相關服務，通過出版物、信息共享平臺、數字圖書館、電子論壇等信息媒介的幫助，科研工作者可快速有效地找到符合需要的信息。目前我國生物信息學發展還很不均衡，與國際前沿有一定差距，這需要從事信息和科研的工作者們不斷交流，使得生物信息學能夠更好地為我國農業持續健康發展發揮作用。

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藥物的生物學特性范文4

【摘要】目的：觀察阿霉素長時間作用對膽管癌細胞株FRH0201生物學活性的影響。方法：用2μg/ml的阿霉素同一濃度逐漸延長時間作用于人膽管癌細胞株FRH0201細胞，經反復作用篩選出能在含1μg/ml的阿霉素培養液中生存72h，去掉阿霉素后仍能繼續穩定傳代生長的細胞。無藥培養1月后進行生物學行為的監測。觀察細胞形態學，繪制生長曲線和流式細胞儀測定細胞周期，酶聯免疫吸附法測定細胞的腫瘤標記物，激光共聚焦顯微鏡觀察細胞內的阿霉素的熒光強度。結果：阿霉素作用后FRH0201細胞形態學有輕度改變，細胞倍增時間較親本細胞延長3h，與親本細胞相比S期細胞增多16.89%，G1期細胞減少29.33%、G2期細胞增多12.46%。CA125和CA199試驗組和親本組分別為9.14和8.60U/ml，1.59和2.96U/ml，細胞內阿霉素濃度（熒光強度平均值），親本細胞為1764.8，試驗組細胞為305.4。結論：阿霉素對膽管癌細胞株FRH0201的形態學及倍增時間無明顯影響，但使細胞進入S期、G2期的增多，細胞內藥物濃度明顯降低，生長時間無明顯變化。

【關鍵詞】膽道腫瘤?阿霉素?腫瘤細胞，培養液?細胞周期?細胞大小?CA125?CA199

The effects of adramycin on the human liver hilar cholangiocarcinona cell line FRH0201

【ABSTRACT】Objective:To investigate the effects of adramycin on cell line of FRH0201.Methods:Human hilar cholangiocarcinona cell line were cultured with adramycin (2μg/ml) through lasting different times，finally this cell line can survive after 72h cultured in the culture liquid with the adramycin(1μg/ml) .Then the medium was replaced with a fresh one without adramycin，and the cells were continuously cultured for 1 month.The in vitro studies included the observation of the appearance with optical microscope，MTT cell proliferation assay，analysis of the cell cycle by Flow cytometry(FACS)，assays of tumor marker using enzymelinked immunosor bent assay(ELISA)，the fluorescence density of adramycin.Results:Compared to the parent FRH0201cell line:The morphology showed typical morphological characteristics，the doubling time prolonged about 3h，the cell cycle by flow cytometry identified in G1，G2 and S phase of cell cycle were 40.50%，19.74%and 39.77% in trial group，and 69.83%，7.29%and 22.88% in parent group，respectively.Tumor marker has no difference between them，the fluorescence density of epirubicin descending 5.2 times.Conclusion:The adramycin can affect the cell cycle and cause the change of metabolism.

【KEY WORDS】Biliary tract neoplasms?Adramycin?Tumor cells，cultured?Cell cycle?Cell size?CA125?CA199

目前，肝門部膽管癌手術切除率已明顯提高，手術病死率明顯下降，但真正達到根治性切除的病例很少，局部復發率很高，現有的化療及放療未見明顯的效果。其原因可能與肝門部膽管癌的生物學特性有關［1］。為此，我們觀察阿霉素長時間作用對膽管癌細胞株FRH0201生物學活性的影響。

1 材料和方法

1.1 材料 阿霉素購于深圳萬樂公司，MTT購自愛博生物工程有限公司，胎牛血清購自杭州四季青公司。膽管癌細胞株FRH0201由本課題組吳小鵬教授構建［2］。

1.2 方法 采用濃度相同不斷增加作用時間的方法確定阿霉素培養液終濃度為1μg/ml。首先分別向FRH0201細胞株的培養瓶內加入不同濃度的阿霉素（Adramycin，ADR），培養3d后觀察細胞死亡情況。結合阿霉素的血漿濃度，選擇可將50%的細胞抑制的藥物濃度（IC50）作為耐藥細胞培養的起始濃度（2μg/ml），將腫瘤細胞置于該培養液中和不含藥物的10%小牛血清RPMI1640培養液培養，待細胞穩定生長、進入對數生長期后，傳代兩次，再將篩選出的細胞在相同藥物濃度培養液中繼續培養。經過1，2，3，6，12，24，36，48，60，72h 10個時間段約8個月的培養，最終使細胞能夠在1μg/ml阿霉素培養液中持續穩定生長并傳代，然后脫藥培養1個月在檢測細胞的生物特性。

1.3 觀察指標

1.3.1 形態學觀察 將兩株細胞分別爬片后經HE染色，光鏡下進行形態學觀察。

1.3.2 細胞倍增時間的測定 取對數生長期的親本細胞即未用藥的細胞和阿霉素作用的細胞與試驗組細胞各一瓶，0.25%胰蛋白酶消化，10%小牛血清1640培養液制成濃度為1×104個/ml的單細胞懸液，96孔板中每孔接種200μ1，37℃、5%CO2飽和濕度孵箱中培養。每天取3個復孔計數活細胞，計算平均值，連續觀察7d。以培養時間為橫軸，以細胞數的對數為縱軸，繪制半對數細胞生長曲線，于生長曲線上對數生長期內取3組數據，根據最小二乘法進行直線回歸，在直線上任取兩點（Nt、No），根據下列公式計算細胞的倍增時間(Td）［3］。T代表No~Nt的時間Td=T×Ig2/Ig(Nt/No）

1.3.3 細胞周期分析 取對數生長期的親本及實驗組細胞各1×106個/ml，制成單細胞懸液，按試劑盒說明進行操作，于流式細胞儀（FCM）上行細胞周期分析。

1.3.4 腫瘤標記物CA125、CA199 分別將同等數量的親本及試驗組細胞接種于培養瓶內，37℃、5%CO2飽和濕度孵箱中培養。待細胞進入對數生長期后，分別收集培養液各10ml，1000r/min離心5min后取上清，用酶聯免疫吸附法進行CA125及CA199的檢測。

1.3.5 激光共聚焦顯微鏡檢測 將親本細胞與試驗組細胞制備單層細胞爬片。將載玻片置于培養皿中10%小牛血清1640培養液制成濃度為1×104個/ml的單細胞懸液，待細胞貼壁生長均勻布滿載玻片后加入2μg/ml阿霉素作用30min，PBS洗滌細胞2次，在磁共振共聚焦顯微鏡下觀察細胞內的阿霉素濃度以熒光強度表示。然后計算平均值。

2 結 果

2.1 形態學改變 倒置顯微鏡下對數生長期的FRH0201細胞呈鋪路石狀鑲嵌緊密排列，細胞呈多邊形、梭形、圓形、不規則形、三角形等各種形態，生長活躍，細胞體積變大，折光性差，核漿比例變大，細胞核增大。有多核細胞，有異常核分裂相。

2.2 細胞倍增時間 實驗組細胞倍增時間為23.6h，延長了約3h。

2.3 細胞周期分析 實驗組細胞與親本細胞相比：S期細胞增多16.89%，G1期細胞減少29.33%、G2期細胞增多12.46%。見圖1、2。

2.5 激光共聚焦顯微鏡檢測 細胞內的阿霉素濃度以熒光強度表示，計算平均值。見圖3。

3 討 論

肝門膽管癌及膽囊癌術后化療是重要的輔助治療手段，但化療的敏感性不高。且可能存在個體性差異及可能誘發的腫瘤多藥耐藥性。為了臨床及基礎方面對膽道惡性腫瘤綜合治療的研究，FRH0201細胞代表原發灶的所有細胞群體［2］，并已成功建立裸鼠動物模型［3、4］，我們用阿霉素對該細胞株進行干預，觀察對其生物學特性的影響。為了更接近臨床膽管癌化療反復間歇用藥的特點，對FRH0201細胞采用大劑量反復間歇同一濃度不同時間暴露，歷時8個月，獲得了穩定生長的細胞。本次試驗不同于其它耐藥株固定藥物濃度，這更符合臨床用藥方式。在本實驗中我們發現在低氧時，腫瘤細胞在含有阿霉素的培養基中可以繼續生長繁殖，一旦更換培養基后同樣劑量的藥物，細胞雖然可以繼續貼壁伸展。但藥物持續存在時卻出現凋亡細胞，隨著作用時間的延長，凋亡細胞逐漸減少。該細胞生物學特性的研究將為下一步耐藥株的建立，探討膽管癌耐藥機理及逆轉耐藥奠定基礎。以往研究發現，與親本細胞株比較，耐藥細胞株在形態、結構及代謝水平等方面均發生了顯著變化［5］。本實驗細胞在無藥培養1個月后生長穩定，倍增時間稍有延長，其分泌的腫瘤標記物如CA125、CA199較親本細胞有所降低，這可能與藥物抑制細胞活性有關，也可能是藥物導致了細胞的分化有關，但是細胞排泄毒性藥物的作用得到了增強。我們推測這些生物學性狀的改變與其耐藥表型密切相關，但其詳細機理尚有待進一步研究。經流式細胞儀分析發現，藥物處理前后試驗組G1期細胞比親本組約減少29.33%，G2期細胞比親本組增加12.46%，S期細胞增多16.89%，說明細胞通過細胞周期限制從G1期進入S期，然后阻滯于G2期，G2期的主要特征是RNA的合成和染色質的螺旋化，此期對外界環境敏感，易受各種因素的影響［6］。提示根據藥物對膽管癌細胞周期各期的影響，在臨床上可以更好地選擇不同的化療藥物，聯合用藥以增加療效，減少副作用。在經藥物作用篩選后1月，細胞內抗腫瘤藥物濃度仍明顯降低，證明了細胞穩定表達了某種機制，該機制可以使腫瘤細胞耐受阿霉素的殺傷作用，但具體的機制需要進一步證實。本實驗提示：（1）通過適當劑量的間歇的持續的沖擊應用抗腫瘤藥物，可以篩選出持續生長的細胞；（2）膽管癌細胞在阿霉素作用下，細胞內的抗腫瘤藥濃度下降，這是腫瘤細胞在含抗腫瘤藥物的掊養液中生長繁殖的基礎；（3）阿霉素可以影響細胞的分裂增殖周期。但該結論尚需今后進一步實驗得以證實。

參 考 文 獻

［1］叢文銘，吳孟超，陳漢.肝內膽管癌多基因變異表型分析［J］.中華醫學雜志，2001，81：271273.

［2］Jokoby WB.Methods in enzymology［M］.New York:Acad Press，1979.150.

［3］吳小鵬，王占民，何曉冉.肝門部膽管癌細胞系FRH0201的建立及生物學特性研究［J］.中華醫學雜志，2005，85(25):17841785.

［4］李志偉，王占民，吳小鵬，等.利用裸鼠建立人肝門部膽管癌肝門移植模型［J］.中國現代普通外科進展，2004，7（4）:209.

藥物的生物學特性范文5

細菌學檢驗結果的準確性首先取決于標本的質量。正確地采集、轉送標本，是直接影響檢驗結果的重要因素和取得準確結果的前提。各種標本(痰液、血液、傷口分泌物和各種感染組織等)采集時應充分考慮到選擇恰當合理的時問，考慮到可能存在的病原菌的性質，按要求采集標本，這樣可使標本包含細菌，并為后續檢驗步驟打下良好的基礎。合格的痰標本在低倍鏡視野里上皮細胞應25個。

涂片染色顯微鏡檢查根據我國結核病防治規劃的要求，對咳嗽、咳痰>13周或有咯血或血痰的肺結核可疑癥狀者，應留取3份痰標本(夜間痰、清晨痰和即時痰)進行痰涂片抗酸染色檢查。即時痰為病人就診時咳出的痰液：清晨痰為清晨深咳出的痰液；夜間痰為就診前1天晚睡前咳出的痰液。留取的痰液標本常規涂片后，進行要爾－尼爾遜氏染色法(ziehl-Neelsen)染色。

分枝桿菌分離培養 結核分枝桿菌是兼性需氧菌，最適生長溫度為37℃，最適pH為6.5～7.2。分枝桿菌分離培養檢查法，是結核病確診最可靠的方法。是獲得純培養物進行菌種鑒定、藥物敏感性試驗以及其他生物學研究的基礎。

當前，我國普遍采用改良L-J(改良羅氏)培養基來分離培養結核分枝桿菌。通常情況下，當每1ml標本中微生物含量達102～3 CFU(菌落形成單位)時，即可培養陽性。分枝桿菌快速培養檢查是使用分枝桿菌快速培養儀(MIGT、BacT/A1err、ESP)，通過測定細菌生長代謝檢測分枝桿菌生長情況的方法。

在進行分枝桿菌快速培養檢查時，標本接種前的祛污染處理，必須嚴格按照系統說明書中給定的方法進行。孵育檢測過程中系統報告陽性時，相應標本的培養液必須首先進行抗酸染色鏡檢，發現抗酸菌后方可發出陽性報告。

分枝桿菌藥物敏感性試驗　分枝桿菌藥物敏感性試驗對于結核病人合理的藥物選擇、合適的藥物劑量以及針對耐藥病人的預防控制具有積極的作用。結核病耐藥性監測可以為評估制定國家結核病控制規劃和控制策略提供科學依據。

分枝桿菌菌種鑒定 目前報道的分枝桿菌種類已有100多種。經抗酸染色鏡檢確定為抗酸菌的培養陽性菌株，應該先接種改良羅氏(L-J)培養基進行增菌傳代后進行傳統方法的菌種鑒定。

傳統方法進行分枝桿菌菌種鑒定，需要經過硝基苯甲酸(PNB)生長試驗、28℃生長試驗、耐熱觸酶試驗，觀察記錄細菌的生長速度、菌落形態和菌落顏色確定該菌株屬于結核分枝桿菌復合群還是NTM。

血清學檢測

涂片染色顯微鏡檢查方法有一定的局限性，因為它對處于相對進展狀態的結核病診斷具有較強的特異性，但其靈敏度在不同實驗室間有所差異。另外，涂片染色顯微鏡檢查需要病人重復送3次痰，這導致有些時候病人的依從性不良，并且涂片染色顯微鏡檢查對涂陰病人、兒童以及肺外結核病不能夠給予診斷，在涂片染色顯微鏡檢查過程中，如果操作不當也可能導致實驗室人員受到感染。

核酸擴增檢測(NAAT)、熒光原位雜交以及熒光高壓液相等快速方法，使得診斷結果報告時間縮短至2天。作為因病原微生物感染所導致的結核病，在臨床上利用免疫學方法檢查宿主對分枝桿菌，特別是結核分枝桿菌感染造成的免疫反應(抗原或／和抗體)，從而幫助臨床醫師進行鑒別診斷，有一定的實際意義；但由于結核分枝桿菌的生物特性及此類病原菌引起的人體免疫反應較為特殊和復雜，因此，目前結核病免疫學的檢測結果，在結核病的臨床診治中，只能夠作為輔助參考，不能作為結核病診斷和評價治療效果的指標。臨床醫師在參考免疫學檢查結果的同時，應該同時參照結核分枝桿菌的傳統微生物學檢查(包括抗酸染色鏡檢，特別是分枝桿菌培養檢查)的結果并參考其他臨床檢查手段所得到的結果進行綜合判斷。

分子生物學檢測技術

藥物的生物學特性范文6

納米材料在結構、光電和化學性質等方面的誘人特征，引起物理學家、材料學家和化學家的濃厚興趣。80年代初期納米材料這一概念形成以后，世界各國對這種材料給予極大關注。它所具有的獨特的物理和化學性質，使人們意識到它的發展可能給物理、化學、材料、生物、醫藥等學科的研究帶來新的機遇。納米材料的應用前景十分廣闊。近年來，它在化工生產領域也得到了一定的應用，并顯示出它的獨特魅力。

1.在催化方面的應用

催化劑在許多化學化工領域中起著舉足輕重的作用，它可以控制反應時間、提高反應效率和反應速度。大多數傳統的催化劑不僅催化效率低，而且其制備是憑經驗進行，不僅造成生產原料的巨大浪費，使經濟效益難以提高，而且對環境也造成污染。納米粒子表面活性中心多，為它作催化劑提供了必要條件。納米粒于作催化劑，可大大提高反應效率，控制反應速度，甚至使原來不能進行的反應也能進行。納米微粒作催化劑比一般催化劑的反應速度提高10～15倍。

納米微粒作為催化劑應用較多的是半導體光催化劑，特別是在有機物制備方面。分散在溶液中的每一個半導體顆粒，可近似地看成是一個短路的微型電池，用能量大于半導體能隙的光照射半導體分散系時，半導體納米粒子吸收光產生電子——空穴對。在電場作用下，電子與空穴分離，分別遷移到粒子表面的不同位置，與溶液中相似的組分進行氧化和還原反應。

光催化反應涉及到許多反應類型，如醇與烴的氧化，無機離子氧化還原，有機物催化脫氫和加氫、氨基酸合成，固氮反應，水凈化處理，水煤氣變換等，其中有些是多相催化難以實現的。半導體多相光催化劑能有效地降解水中的有機污染物。例如納米TiO2，既有較高的光催化活性，又能耐酸堿，對光穩定，無毒，便宜易得，是制備負載型光催化劑的最佳選擇。已有文章報道，選用硅膠為基質，制得了催化活性較高的TiO／SiO2負載型光催化劑。Ni或Cu一Zn化合物的納米顆粒，對某些有機化合物的氫化反應是極好的催化劑，可代替昂貴的鉑或鈕催化劑。納米鉑黑催化劑可使乙烯的氧化反應溫度從600℃降至室溫。用納米微粒作催化劑提高反應效率、優化反應路徑、提高反應速度方面的研究，是未來催化科學不可忽視的重要研究課題，很可能給催化在工業上的應用帶來革命性的變革。

2.在涂料方面的應用

納米材料由于其表面和結構的特殊性，具有一般材料難以獲得的優異性能，顯示出強大的生命力。表面涂層技術也是當今世界關注的熱點。納米材料為表面涂層提供了良好的機遇，使得材料的功能化具有極大的可能。借助于傳統的涂層技術，添加納米材料，可獲得納米復合體系涂層，實現功能的飛躍，使得傳統涂層功能改性。涂層按其用途可分為結構涂層和功能涂層。結構涂層是指涂層提高基體的某些性質和改性；功能涂層是賦予基體所不具備的性能，從而獲得傳統涂層沒有的功能。結構涂層有超硬、耐磨涂層，抗氧化、耐熱、阻燃涂層，耐腐蝕、裝飾涂層等；功能涂層有消光、光反射、光選擇吸收的光學涂層，導電、絕緣、半導體特性的電學涂層，氧敏、濕敏、氣敏的敏感特性涂層等。在涂料中加入納米材料，可進一步提高其防護能力，實現防紫外線照射、耐大氣侵害和抗降解、變色等，在衛生用品上應用可起到殺菌保潔作用。在標牌上使用納米材料涂層，可利用其光學特性，達到儲存太陽能、節約能源的目的。在建材產品如玻璃、涂料中加入適宜的納米材料，可以達到減少光的透射和熱傳遞效果，產生隔熱、阻燃等效果。日本松下公司已研制出具有良好靜電屏蔽的納米涂料，所應用的納米微粒有氧化鐵、二氧化鈦和氧化鋅等。這些具有半導體特性的納米氧化物粒子，在室溫下具有比常規的氧化物高的導電特性，因而能起到靜電屏蔽作用，而且氧化物納米微粒的顏色不同，這樣還可以通過復合控制靜電屏蔽涂料的顏色，克服炭黑靜電屏蔽涂料只有單一顏色的單調性。納米材料的顏色不僅隨粒徑而變，還具有隨角變色效應。在汽車的裝飾噴涂業中，將納米TiO2添加在汽車、轎車的金屬閃光面漆中，能使涂層產生豐富而神秘的色彩效果，從而使傳統汽車面漆舊貌換新顏。納米SiO2是一種抗紫外線輻射材料。在涂料中加入納米SiO2，可使涂料的抗老化性能、光潔度及強度成倍地增加。納米涂層具有良好的應用前景，將為涂層技術帶來一場新的技術革命，也將推動復合材料的研究開發與應用。

3.在其它精細化工方面的應用

精細化工是一個巨大的工業領域，產品數量繁多，用途廣泛，并且影響到人類生活的方方面面。納米材料的優越性無疑也會給精細化工帶來福音，并顯示它的獨特畦力。在橡膠、塑料、涂料等精細化工領域，納米材料都能發揮重要作用。如在橡膠中加入納米SiO2，可以提高橡膠的抗紫外輻射和紅外反射能力。納米Al2O3，和SiO2，加入到普通橡膠中，可以提高橡膠的耐磨性和介電特性，而且彈性也明顯優于用白炭黑作填料的橡膠。塑料中添加一定的納米材料，可以提高塑料的強度和韌性，而且致密性和防水性也相應提高。國外已將納米SiO2，作為添加劑加入到密封膠和粘合劑中，使其密封性和粘合性都大為提高。此外，納米材料在纖維改性、有機玻璃制造方面也都有很好的應用。在有機玻璃中加入經過表面修飾處理的SiO2，可使有機玻璃抗紫外線輻射而達到抗老化的目的；而加入A12O3，不僅不影響玻璃的透明度，而且還會提高玻璃的高溫沖擊韌性。一定粒度的銳鈦礦型TiO2具有優良的紫外線屏蔽性能，而且質地細膩，無毒無臭，添加在化妝品中，可使化妝品的性能得到提高。超細TiO2的應用還可擴展到涂料、塑料、人造纖維等行業。最近又開發了用于食品包裝的TiO2及高檔汽車面漆用的珠光鈦白。納米TiO2，能夠強烈吸收太陽光中的紫外線，產生很強的光化學活性，可以用光催化降解工業廢水中的有機污染物，具有除凈度高，無二次污染，適用性廣泛等優點，在環保水處理中有著很好的應用前景。在環境科學領域，除了利用納米材料作為催化劑來處理工業生產過程中排放的廢料外，還將出現功能獨特的納米膜。這種膜能探測到由化學和生物制劑造成的污染，并能對這些制劑進行過濾，從而消除污染。

4.在醫藥方面的應用

21世紀的健康科學，將以出入意料的速度向前發展，人們對藥物的需求越來越高。控制藥物釋放、減少副作用、提高藥效、發展藥物定向治療，已提到研究日程上來。納米粒子將使藥物在人體內的傳輸更為方便。用數層納米粒子包裹的智能藥物進入人體，可主動搜索并攻擊癌細胞或修補損傷組織；使用納米技術的新型診斷儀器，只需檢測少量血液就能通過其中的蛋白質和DNA診斷出各種疾病，美國麻省理工學院已制備出以納米磁性材料作為藥物載體的靶定向藥物，稱之為“定向導彈”。該技術是在磁性納米微粒包覆蛋白質表面攜帶藥物，注射到人體血管中，通過磁場導航輸送到病變部位，然后釋放藥物。納米粒子的尺寸小，可以在血管中自由流動，因此可以用來檢查和治療身體各部位的病變。對納米微粒的臨床醫療以及放射性治療等方面的應用也進行了大量的研究工作。據《人民日報》報道，我國將納米技術應用于醫學領域獲得成功。南京希科集團利用納米銀技術研制生產出醫用敷料——長效廣譜抗菌棉。這種抗菌棉的生產原理是通過納米技術將銀制成尺寸在納米級的超細小微粒，然后使之附著在棉織物上。銀具有預防潰爛和加速傷口愈合的作用，通過納米技術處理后的銀表面急劇增大，表面結構發生變化，殺菌能力提高200倍左右，對臨床常見的外科感染細菌都有較好的抑制作用。

微粒和納粒作為給藥系統，其制備材料的基本性質是無毒、穩定、有良好的生物性并且與藥物不發生化學反應。納米系統主要用于毒副作用大、生物半衰期短、易被生物酶降解的藥物的給藥。

納米生物學用來研究在納米尺度上的生物過程，從而根據生物學原理發展分子應用工程。在金屬鐵的超細顆粒表面覆蓋一層厚為5～20nm的聚合物后，可以固定大量蛋白質特別是酶，從而控制生化反應。這在生化技術、酶工程中大有用處。使納米技術和生物學相結合，研究分子生物器件，利用納米傳感器，可以獲取細胞內的生物信息，從而了解機體狀態，深化人們對生理及病理的解釋。