【摘要】食品生物技術(shù)是高校食品相關(guān)專業(yè)的一門十分重要的專業(yè)課程，是專業(yè)性強(qiáng)且多學(xué)科交叉的綜合性學(xué)科。由于課程技術(shù)原理和內(nèi)容較多且復(fù)雜，導(dǎo)致教學(xué)效果并不理想。為了提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣和對(duì)知識(shí)的綜合運(yùn)用能力，本文以食品生物技術(shù)課程的核心內(nèi)容基因工程為主，設(shè)計(jì)實(shí)踐課程內(nèi)容，以激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，提高學(xué)生的綜合、創(chuàng)新和創(chuàng)造能力。

【關(guān)鍵詞】食品生物技術(shù)；實(shí)踐；設(shè)計(jì)

1前言

生物技術(shù)是當(dāng)今高科技領(lǐng)域發(fā)展最快、最引人注目的前沿學(xué)科之一。食品生物技術(shù)是生物技術(shù)在食品領(lǐng)域的重要運(yùn)用，是食品相關(guān)專業(yè)教學(xué)的重要內(nèi)容[1]。通過運(yùn)用生物技術(shù)來對(duì)食品進(jìn)行生產(chǎn)或改造，可提高食品產(chǎn)值，改善食品品質(zhì)，提升農(nóng)副產(chǎn)品附加值，對(duì)推動(dòng)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化發(fā)展和食品安全提供了保障[2]。《食品生物技術(shù)》作為一門綜合性學(xué)科，包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程、生物工程下游技術(shù)及現(xiàn)代食品檢測(cè)技術(shù)等主要內(nèi)容[3]，涉及內(nèi)容廣，綜合性強(qiáng)，學(xué)習(xí)難度大[4]。由于缺乏實(shí)踐教學(xué)的設(shè)計(jì)，學(xué)生對(duì)理論課知識(shí)的認(rèn)知仍然欠缺，理論聯(lián)系實(shí)際的能力不足，所以需要開展食品生物技術(shù)的綜合型探索性實(shí)踐課程，以激發(fā)學(xué)生學(xué)生的興趣和積極性，幫助學(xué)生更加全面了解和掌握該課程中涉及的理論知識(shí)和技術(shù)原理，鞏固專業(yè)知識(shí)基礎(chǔ),完成理論課知識(shí)的驗(yàn)證，最終提高學(xué)生的綜合、創(chuàng)新和創(chuàng)造能力[5]。本文根據(jù)我們食品生物技術(shù)課程實(shí)踐教學(xué)設(shè)計(jì)成功經(jīng)驗(yàn)，從提高學(xué)生學(xué)習(xí)興趣及實(shí)踐能力，以及提高學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí)的角度，以食品生物技術(shù)的核心內(nèi)容基因工程作為實(shí)踐課程設(shè)計(jì)的內(nèi)容，為食品生物技術(shù)實(shí)踐教學(xué)設(shè)計(jì)提供一些思路，為食品生物技術(shù)這門課程的講授提供參考。

2基因工程實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

2.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

掌握與基因工程基本操作步驟有關(guān)的實(shí)驗(yàn)技能：熟悉基因組DNA、質(zhì)粒工具載體的提取方法，DNA濃度的測(cè)定方法，聚合酶鏈反應(yīng)（polymerasechainreaction，PCR），限制性內(nèi)切酶與DNA的消化，瓊脂糖凝膠電泳，DNA連接與TA克隆及感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化及利用α互補(bǔ)篩選細(xì)菌克隆的方法。

摘要：隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，我國的城市化進(jìn)程也在不斷加快，工業(yè)、農(nóng)業(yè)等行業(yè)都得到了迅速發(fā)展，但同時(shí)也出現(xiàn)了很多的環(huán)境問題，例如空氣污染、水污染、固體廢棄物污染等，對(duì)生態(tài)環(huán)境造成很大的影響，不利于人們生活質(zhì)量的提高。因此，需要加大對(duì)環(huán)境污染的治理。本文主要介紹了幾種綠色化學(xué)技術(shù)在環(huán)境污染治理與保護(hù)中的應(yīng)用，希望能夠?yàn)槲覈沫h(huán)境污染治理工作提供有效的借鑒。

關(guān)鍵詞：綠色化學(xué)技術(shù)；環(huán)境污染；治理；保護(hù)

隨著社會(huì)的發(fā)展以及生活水平的提高，人們面臨的環(huán)境問題也越來越嚴(yán)峻。綠色化學(xué)技術(shù)是現(xiàn)代處理環(huán)境污染問題的重要途徑，運(yùn)用綠色化學(xué)技術(shù)來治理環(huán)境污染，可以進(jìn)一步提高環(huán)境治理水平，改善環(huán)境質(zhì)量，為公眾的生活提供優(yōu)質(zhì)的環(huán)境。

1綠色化學(xué)技術(shù)的類型

1.1催化技術(shù)

在化學(xué)工藝中，催化劑是實(shí)現(xiàn)工業(yè)中化學(xué)反應(yīng)的重要物質(zhì)，因此催化劑反應(yīng)技術(shù)在工業(yè)生產(chǎn)中得到廣泛的推廣和應(yīng)用，不僅有利于提高工業(yè)生產(chǎn)的效率，同時(shí)還可以對(duì)工業(yè)生產(chǎn)中的污染排放進(jìn)行有效的控制和管理[1]。現(xiàn)階段，所使用的催化技術(shù)主要酶催化技術(shù)、光催化技術(shù)、納米催化技術(shù)。在這三種催化技術(shù)中，與普通的催化劑相比，酶催化技術(shù)的催化效率可以是其普通的催化劑的106～1013倍，納米催化技術(shù)的作用主要是為了提高材料的催化活性，光催化技術(shù)具有較強(qiáng)的氧化能力，且存在較少的二次污染。

1.2膜技術(shù)

［摘要］介紹了農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)可持續(xù)發(fā)展的含義及農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)可持續(xù)發(fā)展的目的及意義，分析了農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)可持續(xù)發(fā)展的總體戰(zhàn)略，提出了實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)可持續(xù)發(fā)展的具體措施。

［關(guān)鍵詞］農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)；可持續(xù)發(fā)展；途徑

可持續(xù)發(fā)展，在我國已經(jīng)不是一個(gè)陌生的概念，目前隨著我國的低碳經(jīng)濟(jì)、綠色經(jīng)濟(jì)的提出，我國的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展也提出了可持續(xù)發(fā)展的理念。隨著科學(xué)技術(shù)的整體發(fā)展，我國農(nóng)業(yè)取得了巨大的發(fā)展，但是在農(nóng)業(yè)生活中，存在著一些竭澤而漁的現(xiàn)象，這對(duì)農(nóng)業(yè)的持續(xù)發(fā)展以及農(nóng)作物的衛(wèi)生安全都有一定的影響，因此實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)的可持續(xù)發(fā)展是十分必要的。基于此，文章圍繞可持續(xù)農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)為中心，分四個(gè)部分展開了細(xì)致的分析探討，旨在提供一些該方面的理論參考。

1農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)可持續(xù)發(fā)展的含義

可持續(xù)發(fā)展的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)在其含義上，可以劃分為三個(gè)方面進(jìn)行闡述，即可持續(xù)的生產(chǎn)、可持續(xù)的經(jīng)濟(jì)運(yùn)作以及可持續(xù)的生態(tài)環(huán)境。其中生產(chǎn)可持續(xù)指的是在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)運(yùn)作中，滿足穩(wěn)定長期的農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)提供，而這一點(diǎn)也是人類能夠在地球上生存的基礎(chǔ)；經(jīng)濟(jì)的可持續(xù)性指的是，在滿足人類基本生活條件之下，能夠不斷實(shí)現(xiàn)從事農(nóng)業(yè)生產(chǎn)人員的收入增加，而要實(shí)現(xiàn)這一目的必須在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的結(jié)構(gòu)上進(jìn)行調(diào)節(jié)，并且在生產(chǎn)技術(shù)上也不斷給以創(chuàng)新；生態(tài)的可持續(xù)指的是人類在進(jìn)行農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，不能對(duì)原有的生態(tài)環(huán)境造成過大的影響。要實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)和環(huán)境的和諧發(fā)展，這是保障長期可持續(xù)農(nóng)業(yè)發(fā)展的基礎(chǔ)。

2農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)可持續(xù)發(fā)展的目的及意義

可持續(xù)發(fā)展的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)其目的是實(shí)現(xiàn)現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和生態(tài)環(huán)境的結(jié)合，進(jìn)而保障在農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展中，貫徹可持續(xù)發(fā)展的基本理念，進(jìn)而不斷推動(dòng)環(huán)境保護(hù)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展的雙贏局面出現(xiàn)。從整體上觀察發(fā)展可持續(xù)農(nóng)業(yè)，其目的更多的是在農(nóng)業(yè)發(fā)展中，通過可再生的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)體系以及可持續(xù)的發(fā)展模式，將先進(jìn)的科學(xué)技術(shù)融入其中，并且總體提升人們的生態(tài)意識(shí)，進(jìn)而達(dá)到農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展化。而實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)的可持續(xù)發(fā)展其意義集中在三個(gè)方面，首先是減少農(nóng)業(yè)生產(chǎn)對(duì)環(huán)境的破壞，進(jìn)而保障農(nóng)產(chǎn)品供應(yīng)的穩(wěn)定、安全；其次為通過可持續(xù)發(fā)展的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)實(shí)行，逐步提升農(nóng)業(yè)生產(chǎn)者的環(huán)保意識(shí)，也提升其經(jīng)濟(jì)上的收入；最后還有利于人類將自然和人類之間的不可逆關(guān)系給以捋順。

摘要：新春37號(hào)是優(yōu)質(zhì)強(qiáng)筋耐旱春小麥品種，新疆大部分春麥區(qū)均適宜種植。近年來，新春37號(hào)種植面積已增至2.7萬公頃左右，667米2平均產(chǎn)量為480～660千克，最高667米2產(chǎn)量達(dá)到735.8千克。本文總結(jié)新春37號(hào)品種來源、農(nóng)藝性狀、品質(zhì)性狀及滴灌高產(chǎn)栽培技術(shù)，以期為該品種大面積種植及豐產(chǎn)豐收提供參考。

關(guān)鍵詞：優(yōu)質(zhì)強(qiáng)筋；耐旱；新春37號(hào)；栽培技術(shù)

一、品種來源

新春37號(hào)（原代號(hào)6-45）是新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院核技術(shù)生物技術(shù)研究所培育的春小麥品種，2012年通過新疆維吾爾自治區(qū)農(nóng)作物品種審定委員會(huì)審定，其母本為高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)品系49-5，父本為優(yōu)質(zhì)強(qiáng)筋品種野貓，當(dāng)代雜交種子經(jīng)60Coγ射線80戈瑞輻照，經(jīng)多代單株、單穗選擇，南繁北育選育而成，適宜在伊犁河谷麥區(qū)、塔額盆地、準(zhǔn)噶爾盆地、塔里木盆地麥區(qū)種植。

二、農(nóng)藝性狀

新春37號(hào)屬春性、早熟小麥品種。生育期在石河子—奇臺(tái)一線為90~100天，在溫泉縣為110天；株高85厘米，幼苗直立，稈硬，抗倒伏，芽鞘綠色，葉色深綠，成熟時(shí)為黃色；穗形呈紡錘形，長芒；護(hù)穎白色，無茸毛，橢圓形；穗長9.8厘米左右，每穗有小穗16～18個(gè)，其中不孕小穗1～2個(gè)，中部小穗結(jié)實(shí)3～4粒，每穗35～40粒；籽粒白色，卵圓形，飽滿，千粒重在47克左右，容重800～820克/升；抗葉銹病、條銹病，高抗白粉病，黑胚率低，抗倒伏能力強(qiáng)，生長勢(shì)好，穩(wěn)產(chǎn)性好。

三、品質(zhì)性狀

摘要：

當(dāng)前，隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展和社會(huì)進(jìn)步，教育改革也是逐步發(fā)展，在新課程改革的不斷深入發(fā)展的過程中，作為高中教學(xué)重要組成方面的生物教學(xué)，在教學(xué)改革上也面臨了許多的問題，教師在授課上需要更多地結(jié)合教育新課程改革的要求，學(xué)生也需要在改革形式下，迅速調(diào)整自己的狀態(tài)。雖然目前發(fā)展問題多多，但是，在這些問題背后都有具體可尋的原因，本文旨在通過分析當(dāng)前高中生物教學(xué)中存在的問題，探析其發(fā)展的深層原因，并分析出解決對(duì)策。

關(guān)鍵詞：

高中生物；新課程改革；存在的問題；對(duì)策分析

引言：

在新課程改革不斷推進(jìn)的背景下，高中生物老師也在不斷的改變?cè)械慕虒W(xué)方式，并探索出符合新課改背景下的教學(xué)方法，從而促使學(xué)生們更好的接受生物知識(shí)。盡管如此，在實(shí)踐教學(xué)過程中，高中生物課堂教學(xué)依舊暴露出諸多的教學(xué)問題，本文由此提出了與之相對(duì)應(yīng)的對(duì)策。

1高中生物教學(xué)存在的問題

摘要：

隨著我國的改革開放和現(xiàn)代化建設(shè)隨著我國的改革開放和現(xiàn)代化建設(shè)，國民經(jīng)濟(jì)獲得了巨大的發(fā)展，人們的生活越來越富裕，但在取得這一系列成就的同時(shí)的同時(shí)，也對(duì)我國的自然環(huán)境帶來了嚴(yán)重的破壞，各種企業(yè)“三廢”的排放等等都成為影響我國自然生態(tài)平衡的主要問題，也成為我國國民經(jīng)濟(jì)進(jìn)一步發(fā)展的障礙我國國民經(jīng)濟(jì)進(jìn)一步發(fā)展的障礙，也成為人們綠色低碳環(huán)保生活路上的攔路虎，在這種嚴(yán)峻的形勢(shì)之下，進(jìn)行環(huán)境污染的治理成為當(dāng)前不可推卸的一個(gè)責(zé)任和任務(wù)為當(dāng)前不可推卸的一個(gè)責(zé)任和任務(wù)，更成為實(shí)現(xiàn)人與自然和諧相處的必要的一步，本文對(duì)環(huán)境治理的幾個(gè)方面進(jìn)行了技術(shù)性的分析和研究析和研究。

關(guān)鍵詞：

綠色低碳；環(huán)境污染；治理；技術(shù)分析

1引言

在我國經(jīng)濟(jì)飛速發(fā)展的今天在我國經(jīng)濟(jì)飛速發(fā)展的今天，自然生態(tài)平衡問題成為廣大人民所關(guān)注和重視的焦點(diǎn)問題大人民所關(guān)注和重視的焦點(diǎn)問題，也是人類所面臨的一次重大考驗(yàn)大考驗(yàn)，只有有效的預(yù)防環(huán)境污染，進(jìn)行環(huán)境治理，在經(jīng)濟(jì)不斷增長的同時(shí)斷增長的同時(shí)，嚴(yán)格控制污染源，控制“三廢”，才能讓人們重新獲取一片碧水藍(lán)天新獲取一片碧水藍(lán)天。

2環(huán)境污染的危害性

［摘要］初中以分科教學(xué)為主，學(xué)生較難從多學(xué)科視角理解生物知識(shí)，造成了某些生物知識(shí)停留在背和記的水平而無法理解和運(yùn)用。文章旨在通過整合語文、數(shù)學(xué)、物理、地理等學(xué)科知識(shí)，促進(jìn)學(xué)生在理解和掌握生物知識(shí)的同時(shí)，提升生物學(xué)學(xué)科核心素養(yǎng)。

［關(guān)鍵詞］初中生物；跨學(xué)科知識(shí)；整合應(yīng)用

21世紀(jì)，人類已進(jìn)入生物科學(xué)和生物技術(shù)的新時(shí)代，生物科學(xué)隨著與物理學(xué)、數(shù)學(xué)以及其他學(xué)科之間不斷交叉、滲透和融合，已經(jīng)日益呈現(xiàn)出主導(dǎo)學(xué)科的地位［1］。作為生物教師，應(yīng)能夠以生物學(xué)科為載體，適度進(jìn)行跨學(xué)科教學(xué)，促進(jìn)學(xué)生從多學(xué)科角度學(xué)習(xí)和理解生物知識(shí)。但具體如何做到跨學(xué)科知識(shí)的整合仍然是比較難解決的問題。一是教師本身是分科教學(xué)模式下培養(yǎng)的，自身水平有限；二是可供參考的跨學(xué)科教學(xué)的案例較少，難以指導(dǎo)教師進(jìn)行實(shí)際教學(xué)。因此，本文擬通過一些教學(xué)案例，為初中生物教師教學(xué)中實(shí)施跨學(xué)科知識(shí)整合應(yīng)用提供借鑒與參考。

一、與語文知識(shí)相整合，提高學(xué)生的語言表達(dá)能力

生物雖然屬于理科，但也需要運(yùn)用語言或?qū)懽鞅磉_(dá)。例如，在初中生物實(shí)驗(yàn)探究后更多地需要學(xué)生進(jìn)行討論與交流，最后得出結(jié)論。學(xué)生需要運(yùn)用生物學(xué)語言準(zhǔn)確表達(dá)自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，讓他人理解并與之進(jìn)行進(jìn)一步的探討，這樣才能使得后續(xù)的實(shí)驗(yàn)探究以及交流變得更有意義。這涉及學(xué)生的語言表達(dá)能力，而該能力也正是語文學(xué)科著重培養(yǎng)的能力之一。科技論文的比賽近幾年層出不窮，其實(shí)質(zhì)就是為了培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)素養(yǎng)。對(duì)此，一些初中學(xué)校與時(shí)俱進(jìn)，要求學(xué)生嘗試寫科技論文，但培養(yǎng)初中生的科技論文寫作能力并非是一個(gè)學(xué)科所能達(dá)成的，需要學(xué)科間的交融。而從學(xué)生熟悉的語文作文寫作開始入手值得嘗試。例如，在教學(xué)《生物圈中的綠色植物》和《動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)和行為》時(shí)，除了可將教材中“借植物抒情”和“借動(dòng)物言志”模塊直接和語文學(xué)科進(jìn)行整合外，還可通過寫作與語文學(xué)科進(jìn)行整合，以培養(yǎng)學(xué)生的語言表達(dá)能力。又如，學(xué)習(xí)綠色植物后，可讓學(xué)生以《猜猜我是誰》為題目，選擇一種自己喜愛的植物進(jìn)行寫作，內(nèi)容包括植物的所屬種類、主要特征、生活環(huán)境和作用等。收集和展示典型的美文，讓學(xué)生通過“猜一猜”“評(píng)一評(píng)”等活動(dòng)，深刻認(rèn)識(shí)“生物圈中的綠色植物”。有關(guān)《動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)和行為》的學(xué)習(xí)也可讓學(xué)生以《我的愛寵》為題目，介紹自己喜歡的動(dòng)物，內(nèi)容包括動(dòng)物的種類、主要特征、運(yùn)動(dòng)方式等。通過這樣的寫作，不僅能讓學(xué)生學(xué)以致用，還能提高他們的文學(xué)素養(yǎng)和語言表達(dá)能力，為科技論文的寫作打好基礎(chǔ)。

二、與數(shù)學(xué)知識(shí)相整合，發(fā)展學(xué)生的科學(xué)思維和科學(xué)探究能力

數(shù)學(xué)是鍛煉和提高學(xué)生邏輯思維能力的學(xué)科之一，特別是在數(shù)量關(guān)系上，能較直觀清晰地表達(dá)事物的問題。學(xué)生學(xué)習(xí)生物較數(shù)學(xué)遲，將一些生物問題轉(zhuǎn)化為數(shù)學(xué)問題，有利于學(xué)生理解事物的現(xiàn)象、原理等知識(shí)。例如，在學(xué)完“植物的器官”后，學(xué)生知道根可以吸水、葉可以通過蒸騰作用失水以及莖具備支持作用，但對(duì)根和葉如何通過莖進(jìn)行運(yùn)輸水分的過程認(rèn)識(shí)并不充分。對(duì)此，教師可利用芹菜的莖做實(shí)驗(yàn)材料，和學(xué)生一起測(cè)量芹菜莖的吸水速度。把芹菜莖放入裝有適量水的燒杯中，再滴加少量的紅墨水，過一段時(shí)間后觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象并記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，利用單位時(shí)間t（min）內(nèi)紅墨水下降的高度h（cm）來計(jì)算芹菜莖的吸水速度（v=h/t）。在實(shí)驗(yàn)的過程中，教師可提問學(xué)生：“影響芹菜莖吸水速度的因素有哪些？如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明？”實(shí)驗(yàn)裝置簡單、操作簡便，方便學(xué)生在課后重復(fù)實(shí)驗(yàn)。又如，教學(xué)《病毒》一章后，大部分學(xué)生對(duì)于病毒的大小仍然只停留在一個(gè)數(shù)值上，難以想象病毒到底有多小。對(duì)此，教師可提出“如何測(cè)量注射器針頭上能容納多少病毒”的問題，并提示學(xué)生運(yùn)用數(shù)學(xué)中的放大比例和周長替換的方法，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行測(cè)量。即提示學(xué)生把針頭（大圓）的直徑放大數(shù)倍再算其面積，把病毒所占面積近似看成圓形（小圓），直徑放大相應(yīng)的倍數(shù)。這樣，生物問題就簡化成“求大圓內(nèi)有多少個(gè)小圓”的數(shù)學(xué)問題，即病毒數(shù)目可用大圓面積除以小圓面積來計(jì)算。通過這樣的測(cè)量，使得學(xué)生對(duì)病毒的大小有了更好的感性認(rèn)識(shí)，很好地發(fā)展了學(xué)生的科學(xué)思維和科學(xué)探究能力。

作者：葉文 楊柳青 張如勝 歐新華 宋克云 單位：長沙市疾病預(yù)防控制中心微生物檢驗(yàn)科

沙門菌屬是引起細(xì)菌性食物中毒的重要病原體之一,目前全世界已分離出2523個(gè)血清型,我國已發(fā)現(xiàn)216個(gè)[1]。快速敏感的檢測(cè)方法對(duì)沙門菌食品衛(wèi)生檢測(cè)來說至關(guān)重要。傳統(tǒng)檢測(cè)沙門菌的分離培養(yǎng)方法煩瑣費(fèi)時(shí);免疫學(xué)方法敏感度有待提高;各種聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法具有敏感、特異的優(yōu)點(diǎn)[2-5],但由于需要特殊的儀器設(shè)備而限制了其在基層單位的應(yīng)用。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(loop-mediatedisothermalam-plification,LAMP)技術(shù)[6,7]是一種新型等溫核酸擴(kuò)增方法,針對(duì)靶基因設(shè)計(jì)4~6條引物,利用一種具有鏈置換活性的BstDNA聚合酶,在恒溫條件(60~65℃)保溫約60min,即可完成核酸擴(kuò)增反應(yīng),產(chǎn)物為針對(duì)靶基因擴(kuò)增產(chǎn)生的各種大小的莖環(huán)狀DNA混合物,副產(chǎn)物為肉眼可見的白色焦磷酸鎂沉淀。目前已有多篇針對(duì)沙門菌的LAMP檢測(cè)研究報(bào)道[8,9],這些研究多側(cè)重于檢測(cè)方法的建立,大多和核酸檢測(cè)方法,如PCR方法進(jìn)行對(duì)照研究,而且用于實(shí)際樣品檢測(cè)研究也較少。為此,本文利用文獻(xiàn)報(bào)道的沙門菌屬LAMP檢測(cè)方法[8]對(duì)135份食品標(biāo)本進(jìn)行LAMP檢測(cè),同時(shí)和分離培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較來評(píng)價(jià)沙門菌屬LAMP檢測(cè)方法在食品衛(wèi)生檢測(cè)中的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值,現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1儀器與試劑DYY-6C型電泳儀(北京六一儀器廠);凝膠成像儀(美國BIO-RAD公司);DK-8D電熱恒溫水槽(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司);全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)(美國BD公司);BstDNA聚合酶(北京紐英倫生物技術(shù)有限公司);Betaine、Mg-SO4(美國Sigma-Aldrich公司);SYBRGreenInu-cleicacidgelstain、SYBRSafeDNAGelStain(美國invitrogen);dNTP(北京天根公司);通用型核酸提取試劑盒(廣州華瑞安生物);緩沖蛋白胨水(BPW)、四硫磺酸鈉煌綠(TTB)、亞硒酸鹽胱氨酸(SC)、亞硫酸鉍瓊脂(BS)、木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)、三糖鐵瓊脂(TSI)、賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基和營養(yǎng)瓊脂平板(廣州環(huán)凱微生物科技有限公司)。

1.1.2標(biāo)本來源2010年7月~10月收集的食品標(biāo)本135份(冷凍生肉:16份;生鮮肉:20份;熟肉制品:21份;即食非發(fā)酵豆制品:17份;速凍米面制品:16份;冰激凌:10份;生水產(chǎn)品:18份;沙拉:6份;鮮榨果汁:7份;生食類蔬菜:4份),見表1。陽性控制菌株為腸炎沙門菌。

1.2方法